Bereiding van antilichamen en bereiding van standaarden: Er kunnen twee schema's worden gebruikt om antilichamen te bereiden. Eén daarvan is het fermenteren en zuiveren van gastheercellen volgens het gevestigde productieproces, en vervolgens het immuniseren van dieren met het verkregen HCP-eiwit om antilichamen te bereiden; het andere schema is: het proces is om de voorraadoplossing van de gastheercel te verkrijgen om antilichamen te verwijderen en vervolgens dieren te immuniseren. De standaard kan worden bereid door het lege plasmide in gastheercellen te transformeren en te fermenteren en te zuiveren volgens het vastgestelde productieproces.
Stroomafwaartse zuivering: Normaal gesproken begint het terugwinnen van recombinante producten die tot expressie zijn gebracht uit gekweekte celsystemen met het oogsten van celkweekvloeistof (HCCF), gevolgd door een reeks stroomafwaartse verwerkingsstappen (DSP). Deze DSP-stappen maken niet alleen productterugwinning mogelijk, maar benadrukken ook de verwijdering van procesgerelateerde onzuiverheden, waaronder HCP, evenals productgerelateerde onzuiverheden, zoals aggregaten. Tenslotte is het HCP-niveau van het recombinante eiwit minder dan 100 ppm, en de immunogene aggregaten met een hoog molecuulgewicht bestaan voor minder dan 5% uit aggregaten.
HCP-karakterisering en kwantificering: De meest gebruikte methode voor HCP-karakterisering en kwantitatieve detectie is de enzymgekoppelde immunosorbenttest (ELISA); met de ontwikkeling van proteomics-technologie kunnen orthogonale methoden ten opzichte van ELISA, zoals tweedimensionale fluorescentieverschil-elektroforesetechnologie (massaspectrometrietechnologieën zoals 2D-DIGE) en vloeibare massaspectrometrie (LC-MS) worden gebruikt voor de karakterisering en analyse van HCP, en kan op objectievere en uitgebreidere wijze de specificiteit en feitelijke HCP-dekking van de HCP ELISA-methode verifiëren. Neem nu de 2D-DIGE-technologie als voorbeeld om de HCP-detectiestappen te schetsen: neem twee identieke gels om tweedimensionale elektroforese uit te voeren op hetzelfde gezuiverde HCP-monster, en voer een immunoblotting-experiment uit op een ervan om het HCP-eiwit in de gel over te brengen naar het membraan. op de gel, en vervolgens incuberen en combineren met HCP-antilichamen. Na het wassen scannen en afbeelden met behulp van ECL of fluorescentie; de andere gel wordt gescand en afgebeeld met behulp van zilverkleuring; de eiwitvlekken in de twee gels worden op elkaar afgestemd en geanalyseerd in speciale analysesoftware, en de berekening krijgt dekkingsresultaten.
Biotech levert biofarmaceutische analysediensten, waaronder analysediensten voor gastheereiwitresiduen (HCP). Baitaipike Biotechnology beschikt over ervaren technisch personeel dat een volledige reeks professionele diensten kan leveren, van experimenteel ontwerp, monstertesten, data-analyse, enz., en mogelijk resterende gastheereiwitten van biologische geneesmiddelen nauwkeurig kan detecteren.